“Purificación y caracterización de la proteína tipo lunasin de amaranto”

Instituto Potosino de la Investigación Científica y Tecnológica. Laboratorio de Proteómica y Expresión Génica de la División de Biología Molecular.

enrique.maldonado@ipicyt.edu.mx

El amaranto es una planta tradicional mexicana que posee granos con alto valor nutricional, contiene proteínas de buena calidad, vitaminas, minerales y varios compuestos fenólicos y flavonoides (Yanes y cols. 1986; Barba de la Rosa y col. 2009). Se han reportado propiedades benéficas para la salud relacionadas con el consumo del amaranto como: disminución de los niveles de triglicéridos y lipoproteínas de baja densidad (LDL); así como también propiedades anti-tumorales y antioxidantes (Kim y cols. 2006a, Kim y cols. 2006b). En un estudio reciente, se ha demostrado que los digeridos trípticos de las fracciones globulinas y glutelinas del grano de amaranto contienen péptidos: anticarcinogéncos, antihipertensivos, antitrombóticos, inmunomoduladores, antioxidativos, entre otros (Silva Sánchez y cols. 2008).
Lunasin es un péptido de 43 aminoácidos cuya secuencia contiene 8 residuos de aspartato (D) en su extremo carboxilo terminal; precedido de un motivo de adhesión celular Arg-Gly-Asp (RGD) y una hélice predicha con una homología estructural a una región conservada en proteínas de unión a cromatina (Gálvez 2001). Se descubrió originalmente como un péptido procesado de una proteína soluble en agua del grano de soya, la albúmina 2S, este péptido llamó la atención ya que al tratar de expresarlo en E. coli se observó una taza de división celular baja y que algunas bacterias dividían su material genético pero sin citocinesis (Gálvez y de Lumen 1999). Se ha demostrado que el péptido lunasin inhibe la transformación celular inducida por agentes químicos cancerígenos y oncogenes en modelos in vivo y en modelos animales para el cáncer de piel; debido a la inhibición de acetilación de histonas que son expuestas al ocurrir el fenómeno de transformación celular; provocando una desregulación en la dinámica de acetilación/desacetilación de una celular normal, provocando apoptosis en células que han sufrido el fenómeno de transformación (Galvéz y de Lumen 1999).

Caracterizar la proteína tipo lunasin de amaranto (Amaranthus hypocondriacus L.) y analizar su bioactividad cáncer-preventiva en modelos in vitro.
Como objetivos específicos se plantearon los siguientes:
1. Obtener extractos proteínicos del grano e identificar la proteína tipo lunasin mediante análisis Western Blot.
2. Purificar el lunasin de amaranto.
3. Analizar la capacidad del lunasin de amaranto para la internalización hacia el núcleo de células vivas.
4. Analizar si el lunasin de amaranto inhibe la acetilación de las Histonas H3 y H4.
5. Comprobar si la proteína tipo lunasin de amaranto ejerce una acción quimioprotectora en la línea celular NIH 3T3 contra el agente cancerígeno 3- metilclorantreno.

En trabajos recientes se reportó que los digeridos trípticos de la fracción proteínica de glutelinas de Amaranthus hypocondriacus L. inducen apoptosis en células HeLa (Silva-Sánchez y cols. 2008). Esta evidencia supone la existencia de un péptido o proteína que modula esta respuesta antiproliferativa celular. En este mismo estudio se identificó una proteína que era reconocida por los anticuerpos contra lunasin de soya. Dadas estas dos evidencias, se sugiere que una proteína conteniendo el péptido lunasin está presente en las semillas de amaranto y que pudiera tener funciones similares tanto en el grano como en las líneas celulares del estudio a las reportadas para el péptido lunasin de soya.